在日化產(chǎn)品供人使用前，有必要對其進行風(fēng)險評估，以便獲得準(zhǔn)確信息，確保消費者的安全。可利用體外重組皮膚模型對日化產(chǎn)品進行安全性評估，主要是針對日化產(chǎn)品成分可能造成的毒性，包括刺激性、腐蝕性、光毒性和遺傳毒性等。

日化產(chǎn)品安全評估-毒理試驗體外評估方法

日化產(chǎn)品安全評估內(nèi)容

1.日化產(chǎn)品刺激性和腐蝕性試驗

皮膚刺激是指皮膚接觸試驗材料后，產(chǎn)生可逆的組織損傷，而皮膚腐蝕是指皮膚在接觸試驗材料后，產(chǎn)生不可逆的組織損傷，通常通過檢測細(xì)胞活性的變化來定義有無刺激性和有無腐蝕性，根據(jù)歐洲替代方法驗證中心(ECVAM)和經(jīng)濟與合作發(fā)展組織(OECD)給出的指南OECDTG439、OECD TG43124.以下內(nèi)容來定義刺激性和腐蝕性。

日化產(chǎn)品刺激性：

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15 min后孵育42h，細(xì)胞活力≤50%，為刺激性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15min后孵育42h，細(xì)胞活力>50%且IL-1x釋放量>60pg/mL，為刺激性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15 min后孵育42h，細(xì)胞活力>50%且IL-1α釋放量≤60 pg/mL，為非刺激性

日化產(chǎn)品腐蝕性：

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3min，細(xì)胞活力<50%，為腐蝕性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3 min，細(xì)胞活力≥50%，但1h后，細(xì)胞活力<15%，為腐蝕性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3min，細(xì)胞活力≥50%，但1h后，細(xì)胞活力≥15%，為非腐蝕性

為了使多種體外重組皮膚模型適用于皮膚腐蝕測試，在OECD給出的指南OECDTG431中，規(guī)定了模型在常規(guī)用于皮膚腐蝕測試之前必須滿足的條件，同時，該指南要求模型能夠正確評估丙烯酸、氫氧化鉀、苯乙基溴等12種參考化學(xué)物質(zhì)的腐蝕性。

通過檢測經(jīng)受試物處理之后重組皮膚模型的組織活力和炎癥因子的表達情況，評估相應(yīng)的刺激性和腐蝕性級別。

2.日化產(chǎn)品成分的光毒性試驗

光毒性反應(yīng)是一種光誘導(dǎo)的急性反應(yīng)，當(dāng)光活性化學(xué)物質(zhì)被太陽光激活并對皮膚具有毒性時，就會發(fā)生光毒性反應(yīng)，對皮膚造成損害。已知多種有機化學(xué)物質(zhì)會引起光毒性反應(yīng)，是因為它們的分子結(jié)構(gòu)中普遍含有吸收太陽光中紫外線的苯環(huán)或雜環(huán)。紫外線分為UVC(200~280nm)、UVB(290~320nm)和UVA(320~400nm)，并且皮膚長期暴露在紫外線下，造成機體產(chǎn)生DNA損傷、氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)等一系列不良癥狀，從而導(dǎo)致皮膚癌發(fā)病率的增加。

國際多中心體外細(xì)胞毒性評估和ECVAM建議使用小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3的中性紅攝取試驗(3T3NRU)分析光毒性水平。

3.日化產(chǎn)品成分的遺傳毒性試驗

遺傳毒性是一個廣義術(shù)語，指環(huán)境中的理化因素對生物體遺傳物質(zhì)造成損傷，從而給機體帶來毒性反應(yīng)。遺傳毒性測試通常通過評估點突變和染色體損傷來進行，而微核是細(xì)胞受到染色體損傷時出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)中的獨立于主核的微小核，它可能來自于細(xì)胞分裂后期不能與其他染色體一起遷移的柒色體片段或整條染色體，所以微核試驗被認(rèn)為是通過評估染色體損傷進而評估遺傳毒性的一種標(biāo)準(zhǔn)方法。

微核試驗作為一種體內(nèi)評估染色體損傷的可靠方法不僅用于危險識別還用于風(fēng)險評估，但之前常在哺乳動物上進行，有悖動物福利和3R原則，利用重組皮膚模型進行體外微核試驗，有效地避開了這種問題，并解決了假陽性率過高的缺點，而且此類模型可以更好的反應(yīng)體內(nèi)的復(fù)雜情況，比如吸收、代謝、組織特異性等，但還需大量實驗驗證可靠性，盡早成為廣泛有效的遺傳毒性體外替代方法

日化產(chǎn)品安全評估-毒理試驗體外評估方法